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浅析铁皮石斛多糖和浸出物检测研究进展

放大字体  缩小字体 发布日期:2017-01-10  来源:专委会  浏览次数:231
核心提示:张国武吴 旻周正娇汪 寅胡于琴普晓文潘艳玲周云洪铁皮石斛Dendrobium officinale Kimuraet Migo是我国传统名贵中药材,具有益胃
张国武 吴 旻 周正娇 汪 寅 胡于琴 普晓文 潘艳玲 周云洪 
 

铁皮石斛Dendrobium officinale Kimuraet Migo是我国传统名贵中药材,具有益胃生津、滋阴清热等独特的功效 [1] ,多糖和醇溶性浸出物是铁皮石斛的主要成分,与药理作用有着密切的联系,是目前判断铁皮石斛质量的主要依据,2015年版《中国药典》在“含量测定”项中规定干品铁皮石斛多糖量不得低于25%,醇溶性浸出物量不得低于6.5% [2] ,因此,研究铁皮石斛不同地区、不同品系、不同采收时期多糖和醇溶性浸出物含量的动态变化规律,对铁皮石斛品种选育与科学采收具有重要的意义。

    1
、材 料

    1.1
仪器与试剂

    紫外可见分光光度计、电热恒温水浴锅、恒温烘箱、高速离心机、电子分析天平、精密型强制对流干燥箱、冰箱、葡萄糖对照品、苯酚等,其他试剂均为分析纯、水为蒸馏水。

    1.2
供试样品


    供试药材产于云南省保山市、云南省德宏州盈江、云南省德宏州瑞丽畹町,栽培地为连栋塑料温室大棚,主体采用热镀锌钢架结构,屋顶形式双弧拱型,骨架热镀锌低碳钢材,遮阳网覆盖,配套小雨型自动喷水系统。基质使用树皮栽种,供试样品包括A、B、C3个地方铁皮石斛品系,2013年4月种植,经形态特征、农艺性状等综合评价 [3] ,2015年4月至2016年11月,间隔30d左右分别采集供试二年生和三年生萌条(萌条生理年龄),每个品系每批采样重复3次,每小区采1 mL样品溶液,置于冰水中加5%苯酚溶液1 mL,混匀,精密加入5 mL浓硫酸,混匀,冰水中静置20min,沸水浴20min,取出冰水中放凉,以1 mL水为空白,于488nm处测定吸光度,试验平行3次。以葡萄糖对照品制作标准曲线,其回归方程为Y=117.23X-0.6732,R²=0.9976,其中Y为吸光度,X为浓度。

2.2 醇溶性浸出物含量测定方法

    参照2015年版《中国药典》(一部)热浸法测定,以95%无水乙醇作溶剂,精密称定供试样品样品3g,置100 mL具塞圆底烧瓶中,精密加乙醇50 mL,密塞,称重,静置1h,水浴回流,保持微沸1h,放冷后取下,密塞,用95%乙醇补足差重,摇匀,过滤,精密量取滤液25 mL,置已干燥至恒重的蒸发皿中,水浴蒸干,于105℃烘箱中干燥3h,取出,置干燥器中冷却30min,迅速精密称重,以干燥品计算供试品中醇溶性浸出物的含量%重复3次。

    2.3
数据统计与分析

    利用Excel对所测数据进行整理,SPSS17.0软件进行单因素方差分析、非参数秩和检验和Duncan新复极差测验的多重比较分析,

    3
、结果与分析

    3.1
多糖积累规律

    供试的3个优良品系多糖含量测定结果和Duncan新复极差测验的多重比较结果见图1铁皮石斛多糖含量与开花季节密切相关,二年生、三年生铁皮石斛在开花前多糖含量均随着生长期增长而增加,为开花结果积累了大量的多糖,开花初期4月达到高峰,开花后迅速下降,开花消耗了大量的多糖。

图2铁皮石斛不同季节、区域品系多糖累规律。不同季节多糖动态变化不一致,与其对温度、光照、湿度等环境因子的响应程度不一致有关,如图各地区多糖含量除二年生4月底采收时与其余品系差异不显著外,多数月份含量差距显著,整体走势相差不大。铁皮石解总水溶性糖及总水溶性多糖的含量受生长期和季节的双重影响。

3.2 醇溶性浸出物累积规律


    供试的3个优良品系醇溶性浸出物含量测定结果和Duncan新复极差,测验的多重比较结果见图3铁皮石斛萌条浸出物含量二年生时随着生长期增长而增加,至三年生铁皮石斛萌芽前2月达到最高点,随着茎基部新芽形成、萌动迅速下降,直至第2年10月初开始回升,第3年新芽萌芽又开始下降,不同采收期铁皮石斛浸出物含量存在极显著差异,浸出物含量的变化与新芽萌动密切相关,铁皮石斛新芽形成前积累了大量的浸出物,为新芽迅速萌动提供物质基础,新芽萌动后浸出物含量迅速下降,不同地区间浸出物含量存在显著差异 [4] ,但动态变化规律基本一致(图4)